摘要： 硒元素广泛的存在于海洋生物体、水质、食品以及饲料中，检测其含量也有着许多的方法。其中荧光分光光度法是对荧光物质进行定性和定量的有效方法，它是硒元素含量测定的一个比较常用的方法。
本文以测定海洋生物体中硒元素含量为例，依据GB 17378.6-2007《海洋监测规范：第6部分生物体分析》12.1 硒 荧光分光光度法（仲裁法），应用港东F-380型荧光分光光度计对硒元素含量进行测定。结果证明此方法操作简便， 线性良好是测定硒元素含量的理想方法。
关键词： 荧光分光光度法 硒 海洋生物体 水 食品 饲料
原理
生物样品经硫酸—高氯酸—钼酸钠消解，在酸性介质 中，四价硒与2,3-二氨基萘（DAN）反应生成有绿色荧光的 4,5-苯并苤硒脑，用环己烷萃取，在激发波长376nm， 发射波长520nm下，进行荧分光光度测定。
实验条件
仪器及附件：
天津港东 F-380 型荧光分光光度计
荧光石英比色皿
分析条件：
激发波长：376nm
发射波长：520nm
药品：
硝酸（优级纯）、高氯酸（优级纯）、盐酸（优级纯）、氨水 （优级纯）、甲基红溶液、乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）、盐酸羟胺、2， 3-二氨基萘、硒标准溶液等。
其它：
精密pH试纸、电热板、分析天平（0.0001g） 、粉碎机、烘箱、水浴锅、具塞比色管、分液漏斗、擦镜纸、容量瓶、三角瓶、移液管等。
样品及标准样品处理
1、样品前处理
将样品进行烘干， 并用玛瑙研钵磨碎， 全部过80目～100目（180μm ～ 154μm）尼龙筛。
2、样品消化
（1）样品制备液流程图
（2）样品空白制备液
按照上面样品制备流程图的步骤制备样品空白制备液，即不加入待测样品，直接进入“加水润湿”步骤。
（3）样品及样品空白待测液
3、标准曲线待测液
取6个250mL锥形瓶， 分别加入0.00mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL,5.00mL硒标准使用液（0.1μg/mL） ，加水约10mL， 混匀。按照样品消化流程对标准品进行消化处理，然后进行待测液的制备，配制成硒标准曲线溶液待测液。
测定结果
应用港东F-380型荧光分光光度计的“光度测定”模块建立硒标准工作曲线，并进行样品测定。
结论
采用荧光分光光度法测定硒元素含量，操作简单，方法准确，是一种理想的方法。
由于硒元素待测液遇光不稳定， 而且在测定过程中需要进行样品的背景扣除， 因此实验对仪器的功能要求更高。港东 F-380型荧光分光光度计率先在硬件上采用了激发侧挡光快门的设置， 从而避免了样品被强光的直接照射； 软件上采用了独特 的双背景扣除功能，自动计算硒元素的浓度，使整个实验操作简便，结果重现性良好。
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Printed in CHINA, September 1, 2011
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